痛风是嘌呤代谢紊乱所致的一种代谢疾病,血尿酸浓度升高,尿g,用10倍质量的50%乙醇回流提取1次,提取15min,过滤,滤液酸钠晶体沉积于下肢骨关节,动脉,脊椎骨间隙组织而引起,表现为关节红、肿、热、痛,关节活动不利,严重者呈关节畸形及功能障碍,且具有反复发作的特点。痛风还可导致冠心病、糖尿病、高血压等疾病的恶化。直到现在尚未有很好的治疗痛风药物。西医药治疗痛风,尚无根治的方法,秋水仙碱、非甾体类抗炎药、别嘌呤醇等药物虽可减轻症状,降低血尿酸,但其作用较单一,很难从根本上治疗痛风,长期服用此类西药对身体造成的伤害远比治疗效果多。
中医药治疗痛风,副作用少,易被患者接受,从而达到长期用药,最终根治疾病的目的。痛风属于祖国医学“痹证”范畴,属湿热外邪,以实证为主,多以“实则泻之”为治疗原则,另外,中医药为多组分药物,可以协同起到配合作用,具有多靶点作用,可平衡各种酶及化学成分的代谢,并控制痛风的炎症发作。
葵花盘为除葵花子后向日葵盘。本发明采葵花盘为原料,版《中药大辞典》载:向日葵花盘,药性甘、寒,归肝经,功用清热平肝、止痛止血;主治高血压、头痛头晕、耳鸣、痛经、子宫出血、疮疹。《河北中草药》曰:“葵花盘清热燥湿,舒气散结,治头痛、头晕、风火牙痛,目赤云翳,颈前腹痛,外用于蜂窝组织炎。”具有明显消炎、利尿、降压的作用。但是传统中药加工方法不能使葵花盘有效成分充分发挥药效,
传统炮制方法并没有起到治疗痛风效果,吉林省金塔集团股份有限公司用现代中草药提取技术研制葵花盘粉系列药食保健产品,对痛风及痛风关节炎有明显疗效。1材料1.1药物与试剂:葵花盘粉由吉林省金塔集团股份有限公司提供,颗粒状。1.2动物:实验SD大鼠,雄性,清洁级,体质量(依20)g,医院实验动物中心提供。
2实验方法与结果2.1组分提取:葵花盘粉颗粒从葵花盘提取精制,内含小分子肽、黄酮、多糖、生物碱等有效成分。小分子肽提取:将葵花盘粉颗粒g溶解于6倍去离子水中,搅拌溶解,调节pH值至8.0,离心沉淀,经微孔滤膜过滤得到除去大分子的蛋白氨基酸溶液,喷雾干燥得到小分子肽颗粒为A组分。总黄酮,生物碱和多糖提取:取葵花盘粉颗粒
减压浓缩到葵花盘粉质量的0.5倍,即得醇提液。药渣晾干后,挥尽乙醇,加10倍量蒸馏水,回流提取1次,提取0.5h,过滤,滤液减压浓缩至生药质量的2倍,加入澄清剂型处理1次后,离心,上清液加入3倍量95%乙醇,搅匀,离心,沉淀真空干燥,即得葵花盘多糖。按蒽酮-硫酸法测得其含量以葡萄糖计为55.2%为B组分。将已预处理好的D大孔树脂0mL,装入内径为60mm,高为1mm的玻璃柱,加入上述提取所得的醇提液,缓慢充分吸附后,以约5倍柱体积的蒸馏水,4BV/h的流速洗去水溶性杂质。再用5BV50%乙醇以1BV/h的流速洗脱,收集洗脱液玉。再用5BV氨水含量为1%的50%乙醇以1BV/h的流速洗脱,收集洗脱液域。洗脱液玉浓缩干燥后即得葵花盘总黄酮,其含量以芦丁计为61.4%为C组分。洗脱液域浓缩干燥后即得葵花盘总生物碱,其含量以甲基葵花碱计含量为75.8%为D组分。2.2分组实验:A组分小分子肽、B组分多糖、C组分黄酮、D组分葵花盘碱,以动物痛风症模型为对象研究其抗痛风作用。
2.2.1抗微晶型尿酸钠诱导的兔急性关节炎试验:ABC组分在给药剂量mg/kg,mg/kg,mg/Kg时能明显降低微晶型尿酸钠(以下简称MSU)诱导的兔关节滑液膜的炎症反应指数。2.2.2抗微晶型尿酸钠诱导的大鼠足跖肿胀:ABC组分、、mg/kg剂量约在1耀3h开始表现出明显抑制MSU诱导的大鼠足肿胀率的升高,持续到24h时还有抑制趋势。2.2.3镇痛作用试验:ACD颗粒、、mg/kg剂量均能使醋酸刺激所致的小鼠扭体次数,明显低于阴性组,抑制率分别为37.65豫、67.83豫与92.48豫,呈一定比例关系。
2.2.4降血尿酸作用:AC颗粒、mg/kg剂量组可明显降低正常小鼠血尿酸水平;而对高尿酸血症小鼠BD颗粒及mg/kg剂量可显著降低高尿酸小鼠血尿酸水平。2.2.5抗炎作用:对醋酸刺激导致的小鼠腹腔毛细血管通透性增高AC在、/kg时有显著抑制作用,抑制率分别为74.78豫和87.92豫。2.2.6AC颗粒、mg/kg剂量可显著抑制小鼠耳急性炎症早期的肿胀度,抑制率分别是46.47豫、50.38豫。
3讨论研究表明,葵花盘粉可以起到抗炎、消肿、止痛、降低血尿酸、溶
解尿酸钠的作用,从葵花盘粉中提取生物碱、黄酮和小分子肽成分同样具有抗炎、消肿、止痛、降低血尿酸、溶解尿酸钠的作用。分析可能
年8月
起作用机理,葵花盘生物可以特异性结合尿酸形成葵花碱尿酸复合酸盐致人血管内皮细胞损伤作用及其配伍变化的研究[J].高等学校化物,消除尿酸;能抑制嘌呤合成和嘌呤代谢,减少体内尿酸含量;同时学学报,9(8).抑制炎性细胞的趋化和减少炎症因子释放,对于急性发作的痛风关[3]赵雪梅,谭昌恒,张辉,等.猫须草提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制作节炎具有独特的抗炎消肿作用。葵花盘黄酮,是一种很强的抗氧剂,用[J].中药药理与临床,9(3).可有效清除体内的氧自由基,阻止核酸的氧化,起到降低嘌呤含量的[4]何清.高尿酸血症和痛风的病因与流行病学[J].中国临床医生,9(1).
作用;可以降低血糖和甘油三酯,降低毛细血管脆性,增加通透性可以减轻肾脏细胞压力,透过更多尿酸。同时可以稳定肾蛋白小管,有利于肾脏代谢尿酸;黄酮可以抑制炎性生物酶的渗出,可以止痛。葵花盘多糖也具有显著的抗氧化、降血糖、抗肿瘤、调节内分泌作用。参考文献[1]李英,陈君,李萍.金银花中酚酸类和黄酮类成分的黄嘌呤氧化酶抑制活性[J].中国药科大学学报,(5).[2]尹莲,邓海山,朱晓勤,等.黄柏生物碱成分在二妙丸类方中保护尿
[5]陶兆燕.吴茱萸碱及其制剂治疗痛风的主要药效学和机制研究[D].成都中医药大学,.[6]刘静波,郭兵兵,张燕.玉米须抑制黄嘌呤氧化酶活性成分的提取工艺研究[J].食品工业科技,(13).[7]王亚杰,张国文.桑色素对黄嘌呤氧化酶活性的抑制作用[J].食品科学,(13).[8]于舒雁.金钱草总黄酮对高尿酸血症动物模型的影响[D].河南中医学院,.
胃炎灵颗粒中芍药苷的含量测定
余辉张咏梅陈晓峰(医院张家港215)
摘要:目的:采用HPLC法测定胃炎灵颗粒中的芍药苷含量。方法:色谱柱为SunFireC18,流动相为甲醇:0.04moL·L-1磷酸二氢钾(35颐65),检测波长nm,流速1.0mL·min-1,柱温30益。结果:芍药苷在0.耀0.滋g范围内与峰面积的线性关系良好(r=0.),平均加样回收率为97.9%,RSD=1.3%。结论:所建方法准确、重复性好,可用于测定胃炎灵颗粒中的芍药苷含量。关键词:胃炎灵颗粒;芍药苷;含量测定;HPLC
中图分类号:R.0文献标识码:B文章编号:6-()08-0-02
DeterminationofpaeoniflorininWeiyanlinggranulebyHPLC
YUHui,ZHANGYong-mei,CHENXiao-feng(ZhangjiagangCityHospitalofTraditionalChineseMedicine,Zhangjiagang,Jiangsu215,China)[Abstract]Objective:ToestablishamethodtodeterminepaeoniflorininWeiyanlinggranule.Methods:AnHPLCmethodwasestablishedwithSunFireC18column.Themobilephasewasconsistedofmethanol-0.04moL·L-1potassiumphosphatemonobasic(35颐65)withtheflowrateof1.0mL·min-1andthedetectivewavelengthwasnm.Thecolumntemperaturewas30益.Results:Withintherangeof0.耀0.滋g,therewasagoodlinearrelation原shipbetweentheconcentrationandpeakareaofpaeoniflorin(r=0.).Theaveragerecoverywas97.9%withRSDof1.3%.Conclusion:Themethod
isaccurate,reliable,reproducibleandsuitableforthedeterminationofpaeoniflorininWeiyanlinggranule.[Keywords]Weiyanlinggranule;paeoniflorin;Determination;HPLC
胃炎灵颗粒源自临床验方,疏肝理气,清肝泄热,解痉止痛,用于治疗胆汁返流性胃炎等症。处方由炮姜、赤芍、栀子、甘草、白芍、郁金、枳实、白花蛇舌草、黄连、黄芪、金钱草等中药组成,芍药苷为君药赤芍、白芍的主要有效成分之一,可作为胃炎灵颗粒质量控制的指标成分。根据文献研究[1-3]现采用HPLC法测定胃炎灵颗粒中的芍药苷含量,方法简便、测定准确、重复性好,可有效地控制制剂的质量。
1仪器与试药
1.1仪器:Waters高效液相色谱仪、Waters二极管阵列检测
1mL,加50%乙醇稀释至10mL,得浓度为0.mg·mL-1的对照品溶液。2.2.2供试品溶液的制备:取胃炎灵颗粒适量,粉碎;取约3g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加甲醇50mL,称定重量,超声处理(功率w,频率40kHz)30min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液即得。
2.2.3阴性供试品溶液的制备:按处方及制法,制成缺赤芍、白芍药材的制剂。取相当于供试品的量,按“2.2.2”项下方法制成阴性供试品溶液。2.3系统适用性试验:分别取对照品溶液、供试品溶液和阴性样品溶
器(美国Waters);分析天平(ShimadzuAux,日本岛津);旋转蒸发液各10滋L,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定,记录色谱图,结
仪(R,上海申顺生物科技有限公司);电热恒温干燥箱(GZX-DH·果见图1。由图1可见,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置
-BS-域,上海跃进医疗器械厂);循环水式多用真空泵(SHB-芋A,上,有相同保留时间的色谱峰,阴性样品对测定无干扰。
上海豫康科教仪器设备有限公司);超声波清洗器(SCQ-,上海声
浦超声波设备厂)。
1.2试药:芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号:-
);胃炎灵颗粒(自制);甲醇为色谱纯;水为哇哈哈纯净水;其
余试剂均为分析纯。
2实验方法与结果
2.1色谱条件:色谱柱SunFireC(4.6mm伊mm,5滋m),流动相为甲18
醇:0.04moL·L-1磷酸二氢钾(35颐65);流速1.0mL·min-1;柱温30益;检测波长nm。2.2溶液的制备2.2.1对照品溶液的制备:精密称取芍药苷对照品5.4mg,置10mL容量瓶中,加50%乙醇定容至刻度,得对照品储备液,精密吸取储备液
A对照品B.供试品C.缺赤芍、白芍阴性对照图1胃炎灵颗粒HPLC
2.4线性关系考察:精密量取芍药苷对照品溶液8、10、14、16、18滋L,分别注入高效液相色谱仪,按以上色谱条件连续进样6次,测定峰面积。